杭州环特生物科技股份有限公司

免疫毒性指标有3个：（1）应用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼，观察中性粒细胞数量；（2）应用转基因巨噬细胞绿色荧光斑马鱼，观察巨噬细胞数量（荧光强度）；（3）注射红色荧光微球，巨噬细胞吞噬微球排出体外

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溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂，能诱导斑马鱼脑脊髓神经细胞髓鞘损伤。经过特异性荧光染色，髓鞘损伤的斑马鱼荧光比正常斑马鱼弱很多，可以在荧光显微镜下明显被观察到。

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斑马鱼具有与人高度保守的调控弹性蛋白的基因，通过检测斑马鱼弹性蛋白基因RNA的相对表达量可以反映护肤产品的紧致功效。

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转基因中性粒细胞荧光斑马鱼的中性粒细胞可在荧光显微镜下被明显观察。因此可以通过尾鳍再生速度、伤口附近的中性粒细胞数量评价供试品修复功效。

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益生菌通过特异性染色（呈红色），肠道内益生菌增殖的斑马鱼肠道会明显变红，由于斑马鱼通体透明的特点，可以明显被观察到。

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【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用供试品组与正常对照组比较胰脂肪酶和胰蛋白酶含量均有明显的升高。2.本实验证实了供试品具有促进肠道消化功能的作用

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通过紫外光照射使斑马鱼尾鳍形成损伤，添加化妆品后，采用拍照方式对斑马鱼尾鳍进行图像采集，分析斑马鱼尾鳍损伤程度并判定抗光老化功效。

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斑马鱼与人类具有非常相似的免疫系统，利用转基因荧光标记技术将斑马鱼体内中性粒细胞进行荧光标记，当供试品接触到斑马鱼皮肤时，通过观察中性粒细胞的迁移、聚集数量可以反应其是否温和。

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皮肤皱纹的出现与胶原蛋白的正常合成和表达密切相关。通过检测斑马鱼胶原蛋白基因RNA的相对表达量可以反映供试品的抗皱功效。

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